Đề tài Tách dòng và thiết kế vector chuyển gen của gen mã hoá protein vỏ (coat protein) từ virus gây bệnh đốm vòng cây đu đủ (PRSV) ở Việt Nam

Mục lụcMở đầuPhần 1 Tổng quan tài liệu1.1. Đặc điểm của cây đu đủ1.1.1. Nguồn gốc và phân loại 1.1.2. Giá trị kinh tế 1.1.3. Phân bố1.1.4. Các bệnh về cây đu đủ1.2. Đặc điểm virus gây bệnh đốm vòng ở đu đủ (PRSV)1.2.1. Cấu trúc 1.2.2. Cơ chế lan truyền 1.2.3. Các biện pháp phòng trừ 1.2.4. Gen kháng virus1.2.5. Những thành tựu trong việc chống lại PRSV ở cây đu đủ1.2.5.1. Trường đại học Hawaii và đại học Cornell, Mỹ1.2.5.2. Trường đại học Kasetsart, Thailand và Queensland, Austrailia1.2.5.3. Trung tâm Công nghệ sinh học, MARDI, Malaysia1.3. Công nghệ sinh học phân tử và ứng dụng để tạo cây chuyển gen1.3.1. Một số vector sử dụng trong sinh học phân tử1.3.1.1 Vector nhân dòng TA-cloning1.3.1.2 Vector biểu hiện protein pRSET1.3.1.3 Vector chuyển gen 1.3.2. Một số loại enzim sử dụng trong sinh học phân tử1.3.2.1 Enzim sao mã ngược (reverse transcriptase)1.3.2.2 Enzim ligase1.3.2.3 Enzim DNA polymerase1.3.2.4 Enzim cắt giới hạn (restriction enzim)1.3.2.5 Enzim Mung-bean nuclease1.3.3. Một số kỹ thuật sinh học phân tử1.3.3.1 Kỹ thuật RT-PCR1.3.3.2 Kỹ thuật Western blotting1.4. Công nghệ thông tin và ứng dụng trong sinh học phân tử1.4.1. Phần mềm tin học DNAstar sử dụng trong SHPT1.4.2. Internet và SHPT.Phần 2 Nguyên liệu và phương pháp nghiên cứu2.1. Nguyên liệu2.2. Phương pháp2.2.1. Tách RNA tổng số chứa mRNA mã hoá protein vỏ của virus PRSV2.2.2. Phương pháp điện di2.2.3. Thiết kế Primer2.2.4. Phương pháp RT-PCR2.2.5. Phương pháp tách và tinh sạch DNA từ gel Agarose bằng ly tâm2.2.6. Phản ứng ghép nối đoạn gen với vector2.2.7. Phương pháp xử lý với enzim giới hạn và Mung-bean nuclease2.2.8. Phương pháp biến nạp2.2.9. Kiểm tra khuẩn lạc chứa vector tái tổ hợp bằng PCR2.2.10. Tách chiết DNA plasmid từ E. coli2.2.11. Phân tích trình tự nucleotide2.2.12. Thiết kế vector chuyển gen mang gen PRSVN2.2.13. Biểu hiện gen CP trong E.coli 2.2.14. Western blottingPhần 3 Kết quả và thảo luậnPhần 4 Kết luận và đề nghịPhần 5 Tài liệu tham khảo

Mục lục

Mở đầu

Phần 1 Tổng quan tài liệu

1.1. Đặc điểm của cây đu đủ

1.1.1. Nguồn gốc và phân loại

1.1.2. Giá trị kinh tế

1.1.3. Phân bố

1.1.4. Các bệnh về cây đu đủ

1.2. Đặc điểm virus gây bệnh đốm vòng ở đu đủ (PRSV)

1.2.1. Cấu trúc

1.2.2. Cơ chế lan truyền

1.2.3. Các biện pháp phòng trừ

1.2.4. Gen kháng virus

1.2.5. Những thành tựu trong việc chống lại PRSV ở cây đu đủ

1.2.5.1. Trường đại học Hawaii và đại học Cornell, Mỹ

1.2.5.2. Trường đại học Kasetsart, Thailand và Queensland, Austrailia

1.2.5.3. Trung tâm Công nghệ sinh học, MARDI, Malaysia

1.3. Công nghệ sinh học phân tử và ứng dụng để tạo cây chuyển gen

1.3.1. Một số vector sử dụng trong sinh học phân tử

1.3.1.1 Vector nhân dòng TA-cloning

1.3.1.2 Vector biểu hiện protein pRSET

1.3.1.3 Vector chuyển gen

1.3.2. Một số loại enzim sử dụng trong sinh học phân tử

1.3.2.1 Enzim sao mã ngược (reverse transcriptase)

1.3.2.2 Enzim ligase

1.3.2.3 Enzim DNA polymerase

1.3.2.4 Enzim cắt giới hạn (restriction enzim)

1.3.2.5 Enzim Mung-bean nuclease

1.3.3. Một số kỹ thuật sinh học phân tử

1.3.3.1 Kỹ thuật RT-PCR

1.3.3.2 Kỹ thuật Western blotting

1.4. Công nghệ thông tin và ứng dụng trong sinh học phân tử

1.4.1. Phần mềm tin học DNAstar sử dụng trong SHPT

1.4.2. Internet và SHPT.

Phần 2 Nguyên liệu và phương pháp nghiên cứu

2.1. Nguyên liệu

2.2. Phương pháp

2.2.1. Tách RNA tổng số chứa mRNA mã hoá protein vỏ của virus PRSV

2.2.2. Phương pháp điện di

2.2.3. Thiết kế Primer

2.2.4. Phương pháp RT-PCR

2.2.5. Phương pháp tách và tinh sạch DNA từ gel Agarose bằng ly tâm

2.2.6. Phản ứng ghép nối đoạn gen với vector

2.2.7. Phương pháp xử lý với enzim giới hạn và Mung-bean nuclease

2.2.8. Phương pháp biến nạp

2.2.9. Kiểm tra khuẩn lạc chứa vector tái tổ hợp bằng PCR

2.2.10. Tách chiết DNA plasmid từ E. coli

2.2.11. Phân tích trình tự nucleotide

2.2.12. Thiết kế vector chuyển gen mang gen PRSVN

2.2.13. Biểu hiện gen CP trong E.coli

2.2.14. Western blotting

Phần 3 Kết quả và thảo luận

Phần 4 Kết luận và đề nghị

Phần 5 Tài liệu tham khảo